ADA Princíp súpravy na stanovenie adenozíndeaminázy (metóda glutamátdehydrogenázy)

V oblasti modernej lekárskej diagnostiky zohráva meranie biochemických ukazovateľov zásadnú úlohu pri diagnostike, liečbe a hodnotení prognózy chorôb. Medzi nimi adenozíndeamináza (ADA), ako dôležitý enzýmový marker zohráva nezastupiteľnú úlohu v diagnostike rôznych ochorení. ADA sa zvyčajne meria pomocou špecifickej súpravy. Tu podrobne predstavujeme princíp súpravy ADA adenozíndeaminázového testu založenej na metóde glutamátdehydrogenázy.

1. Fyziologický význam ADA
ADA je enzým široko prítomný v rôznych tkanivách ľudského tela, najmä v lymfocytoch. Podieľa sa hlavne na metabolickom procese adenozínu, pri premene adenozínu na inozín a amoniak. Za normálnych fyziologických podmienok zostáva aktivita ADA na relatívne stabilnej úrovni. Keď sa však v ľudskom tele vyskytnú určité ochorenia, aktivita ADA sa zmení. Napríklad pri ochoreniach, ako je tuberkulózna pleuristika, hepatitída a cirhóza, sa aktivita ADA výrazne zvýši.

2. Princíp súpravy na stanovenie ADA
Princíp testovacej súpravy ADA (metóda dehydrogenázy kyseliny glutámovej) je založený na ADA, ktorá katalyzuje deamináciu adenozínu za vzniku inozínu a amoniaku a potom pomocou glutamátdehydrogenázy na konverziu amoniaku na glutamát, pričom súčasne produkuje NADH. NADH má charakteristickú absorbanciu pri vlnovej dĺžke 340 nm. Meraním zmeny absorbancie možno nepriamo vypočítať aktivitu ADA.
Konkrétne súprava obsahuje reakčný substrát adenozín, koenzým NADH, glutamátdehydrogenázu a ďalšie potrebné činidlá. Počas reakcie ADA katalyzuje deamináciu adenozínu za vzniku amoniaku, ktorý reaguje s α-ketoglutarátom pôsobením glutamátdehydrogenázy za vzniku glutamátu, pričom spotrebuje NADH. Meraním zmeny absorbancie NADH pred a po reakcii je možné vypočítať aktivitu ADA.

Súprava na stanovenie ADA (metóda dehydrogenázy kyseliny glutámovej) je citlivá, presná a pohodlná metóda na stanovenie ADA. Je založený na princípe, že ADA katalyzuje deamináciu adenozínu za vzniku amoniaku a vypočítava aktivitu ADA meraním zmeny absorbancie NADH. Táto súprava má široké uplatnenie v klinickej medicíne a má veľký význam pre zlepšenie presnosti diagnostiky chorôb, vedenie liečby a hodnotenie prognózy.