O súprave na stanovenie laktátdehydrogenázy

Súprava na stanovenie laktátdehydrogenázy (LDH) poskytuje vysoko citlivú a rýchlu metódu na meranie aktivity LDH. Enzým reaguje so špecifickou sondou za vzniku farby. Súpravy LDH Activity Assay Kit dokážu detekovať hladiny od jednej do sto mU/ml. Dokončenie testu trvá menej ako 30 minút. Sú vhodné aj pre vysokovýkonné analýzy.

Laktátdehydrogenáza (LDH) je rozpustný cytosolický enzým

LDH je cytosolický enzým, ktorý katalyzuje syntézu laktátu a pyruvátu v tele. Jeho koncentrácie v tele môžu naznačovať poškodenie buniek a bežne sa používajú ako biomarkery. Aktivita LDH bola najvyššia v EDL, nasledovaná bránicou a najnižšia v SOL. V sére bolo päť rôznych izoenzýmov a každý sval obsahoval špecifický vzor izoenzýmov LDH. EDL bola najhojnejšia, obsahovala vysoký podiel LDH-5, zatiaľ čo bránica mala najnižšiu aktivitu.

LDH sa uvoľňuje z buniek, keď je narušená integrita plazmatickej membrány. Na rozdiel od toho apoptóza zahŕňa kĺbový rozpad bunky na apoptotické telá viazané na membránu. Tento enzým je tiež všeobecným meradlom permeability plazmatickej membrány. Test cytotoxicity LDH-Glo(tm) poskytuje jednoduchú bioluminiscenčnú metódu kvantifikácie hladín LDH vo vzorkách s nízkym počtom buniek, ako sú 3D mikrotkanivové sféroidy, primárne bunky a kmeňové bunky.

Aktivita LDH je ovplyvnená pH. V tomto experimente sa merala aktivita LDH v médiu GTSF-2 (pH 7,4-7,2) a chybové stĺpce predstavujú štandardné chyby. Pre n = 4 bunky boli signifikantné rozdiely stanovené Wilcoxonovým znamienkovým testom alebo jednovzorkovým t-testom. Po úprave rovnováhy pH sa v bunkách zvýši aktivita LDH a zníži sa hladina bunkovej glukózy.

Je to spoľahlivý indikátor životaschopnosti buniek

Počet životaschopných buniek vo vzorke je indikátorom životaschopnosti buniek. Životaschopnosť buniek hrá kľúčovú úlohu vo všetkých formách bunkovej kultúry. Testy životaschopnosti buniek sa tiež používajú na koreláciu správania buniek s počtom životaschopných buniek. Testy bunkovej životaschopnosti sú populárne vo farmaceutickom priemysle, kde výskumníci používajú rôzne metódy na skríning terapeutík na rôzne ochorenia. Mnoho vyvinutých terapeutík sa zameriava na rakovinové bunky.

Táto testovacia súprava sa ľahko používa, je lacná a ponúka reprodukovateľné výsledky. Odstraňuje potrebu ručnej prípravy a je vhodný pre 96 a 384-jamkové platne. Testovacia súprava obsahuje všetky potrebné činidlá vrátane 96-jamkovej platne. Súprava obsahuje aj protokol, ktorý obsahuje podrobné pokyny. Prietoková cytometria je vynikajúcou voľbou na stanovenie životaschopnosti buniek v laboratóriu.

Súprava životaschopnosti buniek Alamar blue je dostupná od Bio-Rad a Thermo Fisher Scientific. K dispozícii je aj činidlo na test životaschopnosti modrých buniek G-Biosciences Alamar a testovacie činidlo Cell-Quant AlamarBlue. Pomocou tejto súpravy môžete tiež skontrolovať životaschopnosť kryokonzervovaných buniek. Pred rozmrazovaním kryokonzervovaných buniek by ste mali zvážiť typ buniek. Je tiež dôležité použiť vhodné testovacie činidlo pre veľkosť buniek.

Je testovaný a overený

Lekári nestrácajú dôležitosť validácie diagnostického testu. Validácia znamená rozhodovanie založené na konkrétnej interpretácii údajov z hodnotenia. Diagnostické testy sú cenné len vtedy, keď ovplyvňujú rozhodnutia a ak test vedie k zmysluplným zmenám v manažmente pacienta. Lekári sú naučení vyhýbať sa objednávaniu testov, ktoré nemenia manažment. Skvelým príkladom validácie testu je test PSA, ktorý je vysoko spoľahlivý a silne spojený s diagnózou rakoviny prostaty.